服務(wù)熱線
86-021-52261560
發(fā)布時(shí)間:2024-04-08
產(chǎn)品型號(hào):xCElligence RTCA MP
產(chǎn)品特點(diǎn):安捷倫RTCA實(shí)時(shí)無標(biāo)記細(xì)胞分析系統(tǒng)是一種新型的細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng),反映細(xì)胞生物學(xué)狀態(tài)。xCELLigence實(shí)時(shí)細(xì)胞分析MP儀器使用無創(chuàng)電阻抗監(jiān)測(cè),以實(shí)時(shí)無標(biāo)記的方式量化細(xì)胞增殖,細(xì)胞形態(tài)變化和附著質(zhì)量。 MP與其他xCELLigence儀器不同,它可以容納6個(gè)96孔實(shí)時(shí)微電子檢測(cè)板。這六個(gè)板可以同時(shí)控制和監(jiān)控,但彼此獨(dú)立,可為多個(gè)用戶提供大的通量。
安捷倫RTCA實(shí)時(shí)無標(biāo)記細(xì)胞分析系統(tǒng)是一種新型的細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng),反映細(xì)胞生物學(xué)狀態(tài)。xCELLigence®實(shí)時(shí)細(xì)胞分析(RTCA)MP儀器使用無創(chuàng)電阻抗監(jiān)測(cè),以實(shí)時(shí)無標(biāo)記的方式量化細(xì)胞增殖,細(xì)胞形態(tài)變化和附著質(zhì)量。 MP與其他xCELLigence®儀器不同,它可以容納6個(gè)96孔實(shí)時(shí)微電子檢測(cè)板(E-Plate®96)。這六個(gè)板可以同時(shí)控制和監(jiān)控,但彼此獨(dú)立,可為多個(gè)用戶提供大的通量。將MP儀器置于標(biāo)準(zhǔn)的CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中,并通過電線與分析和控制單元接觸,并將其放置在培養(yǎng)箱外。友好的用戶軟件允許對(duì)儀器進(jìn)行實(shí)時(shí)控制和監(jiān)控,并包括實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯示和分析。 消除了傳統(tǒng)終點(diǎn)法的基于細(xì)胞的測(cè)定的時(shí)間和勞動(dòng)密集型步驟,xCELLigence RTCA MP的實(shí)時(shí)細(xì)胞分析大大提高了效率和總體通量。通過消除對(duì)標(biāo)記/染料的需要,獲得的大的相關(guān)數(shù)據(jù)。
細(xì)胞阻抗說明
在細(xì)胞生物化學(xué)測(cè)定和全身生物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)之間定位,基于細(xì)胞的測(cè)定是基礎(chǔ)和應(yīng)用生物學(xué)研究*的工具。然而,許多基于細(xì)胞的測(cè)定法的作用通過以下方式被減少:(1)需要使用標(biāo)記;(2)與連續(xù)監(jiān)測(cè)不相容(即僅產(chǎn)生終點(diǎn)數(shù)據(jù));(3)與正交試驗(yàn)不相容;( 4)無法提供客觀/定量的讀數(shù)。然而,這些缺點(diǎn)都是通過非侵入性的,無標(biāo)記的和實(shí)時(shí)的細(xì)胞阻抗測(cè)定來克服的。 細(xì)胞阻抗測(cè)定的功能單元是融合到微量滴定板孔的底部表面的一組金微電極(圖1)。當(dāng)浸沒在導(dǎo)電溶液(如緩沖液或標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)基)中時(shí),在這些電極上施加電位會(huì)使電子離開負(fù)極,通過本體溶液,然后沉積到正以完成電路。因?yàn)檫@種現(xiàn)象取決于電極與本體溶液相互作用,所以在電極 - 溶液界面處的粘附細(xì)胞的存在阻礙了電子流動(dòng)。該阻抗的大小取決于細(xì)胞的數(shù)量,細(xì)胞的大小和形狀以及細(xì)胞 - 基底附著質(zhì)量。重要的是,金微電極表面和施加的電位(22 mV)都不影響細(xì)胞的健康或行為。
圖1,細(xì)胞阻抗裝置概述在單元格添加之前和之后顯示單個(gè)孔的側(cè)視圖。電極和電池都不被拉伸(為了清晰起見,它們被放大)。在不存在電池的情況下,電流自由流動(dòng)通過培養(yǎng)基,完成電極之間的電路。由于細(xì)胞在電極上粘附并增殖,電流流動(dòng)受阻,提供了細(xì)胞數(shù)量,細(xì)胞大小/形態(tài)以及細(xì)胞 - 基質(zhì)附著質(zhì)量的非常靈敏的讀數(shù)。
阻抗電極:
ACEA的實(shí)時(shí)微電子檢測(cè)板—E-Plate板每孔中的金微電極生物傳感器覆蓋70-80%的表面積(取決于是否存在視野區(qū)域)。而不是圖1所示的簡化的電極對(duì),每個(gè)孔中的電極被連接成形成交錯(cuò)陣列的“線”(圖2)。這種布置可以同時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞群體,從而提供精確的靈敏度:附著于板的細(xì)胞數(shù),細(xì)胞的大小/形態(tài)以及細(xì)胞 - 基質(zhì)附著質(zhì)量。
圖2,ACEA實(shí)時(shí)微電子檢測(cè)板— E-Plate板上的阻抗電極。 (A)實(shí)時(shí)微電子檢測(cè)板的每個(gè)孔中使用的叉指電極的簡化示意圖。電極沒有按比例繪制(僅顯示一些電極,為了清晰起見,它們已被放大)。雖然細(xì)胞也可以在金電極表面上可視化,但在中間的無電極區(qū)域有助于顯微成像(亮場(chǎng),熒光等)。(B)16孔E-Plate板中單井的照片。(C)放大陰影電極和未染色人體細(xì)胞的明場(chǎng)圖像。(D)復(fù)合顯微鏡中觀察到的金電極和結(jié)晶紫染色的人細(xì)胞。
實(shí)時(shí)阻力跟蹤說明
使用稱為細(xì)胞指數(shù)(CI)的無單位參數(shù)報(bào)告了由貼壁細(xì)胞引起的電子流的阻抗,其中CI =(時(shí)間點(diǎn)n阻抗-不存在細(xì)胞時(shí)阻抗)/標(biāo)稱阻抗值。圖3提供了在建立和運(yùn)行凋亡實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)時(shí)阻抗曲線的通用示例。在細(xì)胞添加到孔中的頭幾個(gè)小時(shí)之后,阻抗快速增加。這是由于懸浮液中的細(xì)胞脫落,沉積在電極上并形成局部粘連。如果添加的細(xì)胞的初始數(shù)量低,并且在井底上存在空的空間,則細(xì)胞將增殖,導(dǎo)致CI逐漸但穩(wěn)定增加。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到匯合CI值時(shí),反映了大容量介質(zhì)可接近的電極表面積不再改變的事實(shí)。此時(shí)加入細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑導(dǎo)致CI降低至零。雖然這個(gè)通用實(shí)例涉及細(xì)胞融合時(shí)的藥物添加,基于阻抗的測(cè)定是非常靈活的,并且還可以評(píng)估初始細(xì)胞粘附到電極的速率和程度,或細(xì)胞增殖的速率和程度。
圖3.用于建立和運(yùn)行凋亡測(cè)定的通用實(shí)時(shí)阻抗曲線。 在文中解釋了阻抗曲線的每個(gè)階段及其產(chǎn)生的蜂窩行為。
上述通用示例,圖4顯示了使用ACEA的xCELLigence實(shí)時(shí)單元分析(RTCA)儀器中的E-Plate板中采集的實(shí)際實(shí)時(shí)阻抗數(shù)據(jù)。 圖4A顯示將A549細(xì)胞添加到E-Plate板后的頭兩個(gè)小時(shí)的阻抗曲線,其中孔預(yù)先用不同濃度的膠原IV包被。 雖然圖4B顯示了在將HeLa細(xì)胞暴露于GPCR激動(dòng)劑多巴胺的初幾分鐘內(nèi)發(fā)生的細(xì)胞指數(shù)的變化,圖4C評(píng)估了在20小時(shí)內(nèi)NK細(xì)胞介導(dǎo)的癌細(xì)胞的細(xì)胞溶解。 圖4D突出顯示根據(jù)藥物的作用機(jī)制可能在細(xì)胞指數(shù)中發(fā)生的變化。
圖4.使用E-Plate和xCELLigence RTCA儀器獲得的實(shí)時(shí)阻抗曲線的示例。 (A)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)已經(jīng)預(yù)先涂覆不同濃度膠原IV的E-Plate孔的A549細(xì)胞粘附。請(qǐng)注意阻抗值(細(xì)胞指數(shù))與顯微鏡中可見的貼壁細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。 (B)暴露于不同濃度GPCR激動(dòng)劑多巴胺的HeLa細(xì)胞的實(shí)時(shí)阻抗曲線。黑色箭頭表示多巴胺加入的時(shí)間。 (C)用于NK細(xì)胞介導(dǎo)的MCF7乳腺癌細(xì)胞溶解的實(shí)時(shí)阻抗曲線。 (D)暴露于藥物的A549細(xì)胞的實(shí)時(shí)阻抗曲線顯示各種作用機(jī)制。
與細(xì)胞相關(guān)的抵抗力
安捷倫RTCA實(shí)時(shí)無標(biāo)記細(xì)胞分析系統(tǒng)RTCA提供細(xì)胞數(shù)量,增殖率,細(xì)胞大小/形狀和細(xì)胞 - 底物附著質(zhì)量的定量讀數(shù)。由于這些物理性質(zhì)是數(shù)千種不同基因/蛋白質(zhì)的產(chǎn)物,因此RTCA可以為細(xì)胞健康和行為提供非常廣泛的視野。在xCELLigence儀器上已經(jīng)成功地分析了從內(nèi)皮屏障功能和趨化性到絲狀偽足動(dòng)力學(xué)和免疫細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞溶解的一切。盡管它們的廣泛性,xCELLigence測(cè)定仍然能夠詢問非常具體的生化和細(xì)胞現(xiàn)象。適當(dāng)使用對(duì)照和/或正交技術(shù)使得可以將阻抗跡線的特征與特定的細(xì)胞/分子現(xiàn)象相關(guān)聯(lián)。要了解如何做到這一點(diǎn),并且看到xCELLigence RTCA技術(shù)的敏感性和多功能性,請(qǐng)仔細(xì)閱讀這里突出顯示的許多具體應(yīng)用。
Copyright © 2024 版權(quán)所有:上海昊擴(kuò)科學(xué)器材有限公司 ICP備案號(hào):滬ICP備20016915號(hào)-1 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 總流量:165730 網(wǎng)站地圖